УКР РУС

Диагностика коронавирусной инфекции Covid-19: методы и рекомендации.

Последнее обновление информации - 01 апреля 2020 г.

Приведенные материалы базируются на результатах обследования 11500 пациентов в Zhongnan Hospital (г. Ухань, Китай), из которых было отобрано 276 потенциальных носителей коронавирусной инфекции; у 170 из них диагноз был подтвержден. Также использована официальная информация ВООЗ и регуляторных органов ЕС.

Когда можно подозревать, что вы заразились коронавирусом Covid-19?

В группу риска с высокой вероятностью заражения коронавирусной инфекцией относятся пациенты с любыми двумя (или более) признаками из симптомов и любым (один или более) признаком по рискам.

Симптомы:

  • лихорадка (повышенная температура тела);
  • уровень лейкоцитов нормальный или пониженный;
  • количество лимфоцитов уменьшено;
  • наличествуют признаки пневмонии, а именно: основные – усталость, кашель, повышенная температура, дополнительные – одышка, боль в груди, выделение мокроты.

Риски:

  • пребывание в течение двух недель до появления симптомов (из группы симптомов) в местностях или городах, где есть подтвержденные случаи коронавирусной инфекции;
  • контакт с людьми, которые имели симптомы заболевания и пребывали в местах с подтвержденными случаями заражения Covid-19, который состоялся максимум 14 дней до появления симптомов болезни;
  • попадание в очаг инфекции (когда один подтвержденный случай и одновременно один или несколько случаев лихорадки или респираторной инфекции обнаруживаются на небольшой территории (например, семья, строительная площадка, военное подразделение и т.д.) в течение 14 дней).

Важно! – болезнь развивается без симптомов от 3 до 7 дней, максимально – 14 дней. В течение всего этого времени носители болезни заразны. Если контакт произошел лишь за 2 дня до появления симптомов, или прошло более двух недель с момента контакта, следует предположить, что это не коронавирусная инфекция.

Заражение коронавирусом происходит при близком контакте. Под близким контактом подразумевается:

  • Проживание, обучение, работа или иной тесный контакт с человеком, который имеет подтвержденный диагноз коронавирусной инфекции, в том числе проживание в одной квартире или доме;
  • Тесный контакт с больным в одном транспортном средстве, включая тех, кто сопровождает пациента в транспортном средстве;
  • Медицинский персонал и члены их семей, проживающие вместе с ними, которые принимали участие в лечении, уходе и/или диагностике или простом контакте с пациентами с подтвержденным диагнозом, или другой персонал, который при исполнении служебных обязанностей имеет подобный тесный контакт с больным или находится с ним в закрытом помещении.

Проявления болезни:

Важнейшим и типичным симптомом заражения коронавирусом Covid-19 является лихорадка. Что касается других проявлений, то среди них наблюдаются преимущественно симптомы пневмонии, такие как усталость, сухой кашель, одышка и т.д., с заложенностью носа или без него, насморк или другие симптомы поражения верхних дыхательных путей. Не существует специфического симптома, по которому при обследовании можно однозначно утверждать о заболевании коронавирусной инфекцией.

Способы диагностики и подтверждения диагноза коронавирусной инфекции Covid-19

Важно при обнаружении больного с подозрением на заражение вирусом Covid-19 точно определить вид возбудителя. Известно немало микроорганизмов, которые способны вызвать пневмонию. Это: вирус гриппа и парагриппа, аденовирус, риновирус, метапневмовирус человека, ортопневмовирус и другие подобные вирусы. Кроме вирусов, пневмонии вызывают микоплазмы, хламидии, некоторые бактерии. В дополнение, существуют пневмонии неинфекционного характера.

Лабораторные тесты при Коронавирусная инфекции Covid-19

1. Важнейшим и максимально точным лабораторным методом по состоянию на 01 апреля 2020 является определение наличия участков нуклеиновых кислот возбудителя методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). По состоянию на эту дату разработано несколько комплектов для определения вируса Covid-19, каждый из которых направлен на поиск своего уникального участка его генетического кода. Все они дают надежные результаты при условии соблюдения сложных требований к чистоте проведения отбора материала (лучше всего – мазки из горла или других участков дыхательных путей).

Суть метода ПЦР заключается в том, что с помощью специальной методики и реактивов генетическая информация вируса многократно копируется в лабораторных условиях специальным прибором – амплификатором, увеличивая свою концентрацию в два раза в каждом цикле копирования. Это дает возможность выявить вирус или бактерию даже в тех случаях, когда его количество составляет лишь сотню клеток в миллилитре крови. Второе уникальное преимущество метода ПЦР – это его чрезвычайная, практически 100% избирательность относительно конкретного возбудителя заболевания. Если генетическая информация тестируемой бактерии или вируса в пробе отсутствует, то она не копируется и не определяется.

Если определение наличия коронавируса Covid-19 в крови (или другом биологическом материале) проводится этим методом в лаборатории, оборудованной по современным стандартам и соответственно обученным персоналом, то установление наличия инфекции длится несколько часов, а сама лаборатория способна определять сотни проб в день.

2. В конце февраля - начале марта 2020 года несколько компаний заявили о разработке быстрого иммунологического теста на коронавирусную инфекцию Covid-19. По состоянию на 1 апреля 2020 количество экспресс-тестов на рынках ЕС и других развитых стран достигает нескольких десятков. Экспресс-тесты - это качественные или полуколичественные способы диагностики, которые дают ответ лишь на вопрос, имеются ли признаки присутствия коронавируса в организме пациента и, фактически, не дают возможность оценить количество возбудителя. Эти тесты не требуют использования специального оборудования и специально обученного персонала. Продолжительность процедуры анализа находится в пределах 10-30 минут, а сам результат требует обязательной проверки методом ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Существует два типа быстрых тестов на COVID-19, которые используются уже или находятся на стадии испытаний:

  •  тесты непосредственного выявления антигена SARS-CoV-2, которые установят наличие компонентов самого вируса (например белковой оболочки)
  •  тесты выявления антител, которые вырабатываются имунной системой организма в ответ на вторжение коронавируса.

Количество тестов на антиген SARS-CoV-2, которые прошли регистрацию в ЕС, достигло 10 по состоянию на 1 апреля 2020 года. Тестов на выявление антител значительно больше - неправительственная организация FIND насчитала таких более 60, и все они прошли проверку в странах Европейского союза. Актуальный перечень быстрых тестов ищите по ссылке: SARS-CoV-2 immunoassays.

Наиболее распространенными в экспресс-диагностике остаются непрямые тесты по выявлению иммуноглобулинов. С помощью этих комплектов за считанные минут определяют наличие двух иммуноглобулинов в крови - IgM и IgG.

Процедура анализа чрезвычайно проста:

  1. Собрать в пробирку пробу крови или плазмы или сыворотки.
  2. Добавить каплю пробы в специальное углубление на панели с тестовой лентой.
  3. Капнуть в углубление 2-3 капли буферного раствора.
  4. Через 15 минут получаем результат - это появление окрашенных участков на тестовой ленте. Участки показывают или отрицательный результат, или наличие иммуноглобулинов IgM и IgG, как отдельно, так и обоих вместе.

После вторжения вируса в организм, в крови больного начинают появляться антитела (иммуноглобулины), сначала иммуноглобулин класса M (IgM), позднее – иммуноглобулин класса G (IgG), после чего активируется иммунитет и клетки иммунной системы атакуют собственные клетки, зараженные вирусом. Таким образом определение IgG не используется при ранней диагностике инфекции – он обнаруживается в крови на поздних стадиях болезни и определяет появление стойкого иммунитета в дальнейшем.

Зато антитела IgM появляются уже через несколько дней после первых проявлений болезни, их концентрация достигает максимума на 2-3 недели. Увеличение содержания иммуноглобулина IgM в сыворотке крови, по сравнению с предыдущим анализом, указывает на то, что пациент заразился вирусом впервые. Через 3-4 месяца после заболевания содержание антител IgM к вирусу уменьшается и они не определяются обычными лабораторными методами. IgM первым среди всех иммуноглобулинов производятся при контакте организма с инфекцией, поэтому их называют иммуноглобулинами первичного иммунного ответа. Их присутствие в крови свидетельствует об острой стадии инфекционного процесса.

3. Определение антигенов гриппадополнительное обследование для исключения или подтверждения пневмонии, вызванной этим вирусом. На сегодня определяют подтипы гриппа A, B и H7N. Эти тесты быстрые и опробованные, но имеют недостаток – относительно большое количество ложно отрицательных результатов, то есть недостаточную чувствительность.

4. Определение нуклеиновых кислот вирусов и бактерий, вызывающих респираторные заболевания – вспомогательный метод, позволяющий исключить другие инфекции. Исследуют наличие РНК и ДНК микоплазмы, хламидии, гриппа А и В, парагриппа, аденовируса и др.

5. Кроме указанных выше специфических анализов, у больных коронавирусной инфекцией, и для лиц с подозрением на это заболевание, определяют газы, растворенные в крови, печеночные и почечные пробы, миоглобин, ферменты миокарда, скорость оседания эритроцитов, С-реактивный белок, общий анализ мочи и проводят другие исследования, которые позволяют уточнить состояние пациента и назначить нужное лечение. Особенности изменения в клинических анализах при коронавирусной инфекции: на ранних стадиях болезни общее количество лейкоцитов в капиллярной крови нормальное или сниженое, также уменьшается количество лимфоцитов. У некоторых пациентов возрастает концентрация трансаминаз - АЛТ и АСТ, креатинкиназы и миоглобина. Скорость оседания эритроцитов, С-реактивный белок и прокальцитонин остаются в норме. В некоторых случаях ростет содержание D-димера.

6. Обязательным и жизненно важным обследования является рентгенограмма, результаты которой расшифровываются специалистом рентгенологом-диагностом, так же, как и результаты лабораторных анализов должны интерпретироваться исключительно дипломированным и подготовленным специалистом!

Составлено по материалам "A rapid advice guideline for the diagnosis and treatment of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) infected pneumonia (standard version)"